[생화학 실험보고서] 다당류의 구조 분석,요오드의 산화반응
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[생화학 실험보고서] 다당류의 구조 분석,요오드의 산화반응

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목차

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본문내용

1. 목적
다당류의 1차적 구조를 결정하는 데에는 과요오드 산화 반응이 널리 사용된다. 이 실험에서는 포름산 적정을 이용하여 glycogen의 구조를 분석하고, 단당류를 포름산 적정하여 과요오드화 산화 반응과 비교한다.

2. 원리
1) 과요오드 산화 반응은 두 개의 히드록실기가 이웃하거나, 한 개의 히드록실기가 알데히드 또는 케톤과 이웃하 고 있을 때, 산화와 탄소-탄소 결합의 분해를 동시에 가져온다.


2) 많은 화합물에 대한 정보는 periodate의 환원된 몰수와 생성된 포름산의 몰수에 의해 알 수 있다. 각각의 자유 알데히드와 케톤과 동적 평형을 이루는 당의 헤미아세탈과 헤미케탈은 알데히드와 케톤처럼 반응한다. periodate와 반응할 두 연이은 탄소의 작용기가 다른 결합으로 연결되어 있으면, 산화도 분해도 일어나지 않는다.

3) 시료 1g당 소비된 과요오드의 몰수는 산성 조건하의 요오드로의 변환에서 알 수 있다. 반응 안한 와 반 응 후 산물인 둘 다 아래의 반응식과 같이 반응한다.


위의 반응에 의해서 가 분해한 탄소 간의 결합 하나 당 가 덜 생기게 된다. 위 반응에 의해 생긴 요오드 는 지시약으로서 푸른색 녹말-요오드를 사용한 thiosulfate를 사용해 아래와 같이 적정할 수 있다.

이 때문에 적정을 위하여 요오드 한 분자당 2분자의 thiosulfate가 필요하다.


과요오드 산화 반응에서 생긴 포름산의 양은 에틸렌 글리콜로 반응에 참가하지 않은 를 제거한 후, 약 알 칼리로 적정하여 결정한다.
5) glycogen의 분자량이 (270,000 ~ 100,000,000)이므로 과요오드 산화 반응에서 얻을 수 있는 정보는 다음과 같다.
① 오직 말단의 glucose 잔기만이 포름산을 생성한다. 비환원성 말단에서는 1개의 포름산이, 환원성 말단에서는 2개의 포름산이 생성되게 된다. glycogen 1 분자당 한 개의 환원성 말단이 존재하므로 상대적으로 많은 양 인 비환원성 말단에 대해 실험오차 안에서 무시하면, 생성되는 포름산의 양은 비환원성 말단의 수(n)와 일치 하게 된다.(실제로는 n-1개이다.)
② 가지가 생성되는 수는 비환원성 말단의 수 와 일치한다.(실제로는 n-1개이다.)
③ 가지가 생긴 곳을 자르면 생기는 조각의 수는 비환원성 말

참고문헌

1) 생화학실험(1) 실험교본, 교육부의생명특성화사업단.
2) Jeremy M. Berg, John L. Tymoczko, Lubert Stryer. 2007, Biochemistry, sixth ed.
3) http://bric.postech.ac.kr/
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