크로마토그래피 예비
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크로마토그래피 예비

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크로마토그래피 예비

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본문내용

크로마토그래피 예비
3. 이론
크로마토그래피는 요즈음 가장 많이 사용되는 중요한 분리 방법의 하나이며, 화합물이 고체표면에 흡착되는 정도의 차이를 이용한 “흡착 크로마토그래피”, 작은 분자가 교대로 결합된 겔의 틈새를 잘 침투하는 효과를 이용하는 “젤 투과 크로마토그래피”, 주어진 pH에서 화합물이 해리해서 생긴 이온의 전하 차이를 이용하는 “이온교환 크로마토그래피”와 용매에 녹는 정도가 다른 점을 이용한 “분배 크로마토그래피”등의 여러 가지 방법이 있는데, 이 실험에서는 분배 크로마토그래피를 다루기로 한다.
석유 에터와 물을 혼합한 용액에 분자의 극성이 다른 설탕, 아세트산, 식용유를 넣고 흔들어준 후 두 층으로 갈라지게 하면 극성이 큰 설탕은 대부분이 극성이 큰 물 속에 녹아있고, 극성이 작은 식용유는 극성이 작은 석유 에터에 녹아있게 된다. 물보다 극성이 작은 아세트산은 물과 석유에터층에 비슷하게 분배된다. 이와 같이 물질마다 두 가지 용매에 대한 분배계수가 다른 점을 이용하는 크로마토그래피를 “분배 크로마토그래피”라고 한다. 극성이 다른 용액을 흘려주면서 두 액체 사이에 물질의 분배가 일어나도록 하는 경우를 액체-액체 분배 크로마토그래피라고 하고, 기체를 이동상으로 이용하는 경우를 기체-액체 분배 크로마토그래피라고 한다.
처음에는 실리카젤이나 알루미나 같이 극성이 큰 표면에 물 같이 극성이 큰 액체 막을 입힌 정지상과 극성이 작은 용액을 이동상으로 사용하는 정상 액체 크로마토그래피 방법이 개발되었다. 실험 A에서는 실리카젤의 얇은 막을 알루미늄이나 플라스틱 판에 입힌 정지상을 사용하는 얇은 층 크로마토그래피를 이용해서 색소를 분리한다. TLC에서의 이동상은 보통 전개제라고 부르며, 뷰탄올, 아세트산, 암모니아처럼 물보다 극성이 작은 화합물의 혼합 용액이 많이 사용된다. 모세관 현상으로 전개제가 TLC판 위쪽으로 전개될 때 시료 분자들도 함께 퍼지게 되는데, 시료 분자들이 정지상에서 노출된 실리카젤의 실란울기와 이동상 사이에 분배되는 계수가 다르기 때문에 전개제가 위쪽으로 올라가면서 시료 분자들이 분리된다.
각 시료가 움직인 거리와 용매가 움직인 위치까지의 거리의 비를 값 이라 하며, 화합물과 사용하는 전개제의 종류에 따라 독특한 값을 나타내기 때문에 물질의 확인에 매우 유용하다.
역상 액체 크로마토그래피에서는 옥타데실기처럼 긴 탄화수소 사슬이 공유결합으로 결합된 막을 입힌 작은 입자를 정지상으로 사용한다. 탄소와 수소는 전기음성도의 차이가 작기 때문에 C-H 결합은 무극성이고, 37개의 C-H 결합을 가진 C-18기가 결합된 막을 가진 정지상은 극성이 대단히 낮은 분자 단위의 액체막이라고 생각할 수 있다. 역상 액체 크로마토그래피에서는 물과 유기용매를 섞어서 극성을 조절한 혼합용액을 이동상으로 사용한다. 역상 크로마토그래피의 원리는 극성이 다른 색소의 혼합물을 C-18 마트리지에 통과시키면 극성이 작은 색소는 C-18기와 친화적 상호작용을 하기 때문에 정지상에 오래 머물게 되고, 물과 상호작용을 더 잘하는 극성이 큰 화합물은 물을 따라 먼저 흘러나오게 된다.
4. 실험 기구 및 시약
A) 실험기구
- 500 mL비커(beaker)
- 시계 접시(watch glass)
- 모세관(capillary tube)

참고문헌

없음
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